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lipo3000全新的轉(zhuǎn)染試劑

能轉(zhuǎn)染難處理細(xì)胞的通用型試劑：

• zui高的效率—適用于各種難以轉(zhuǎn)染的以及常見(jiàn)的細(xì)胞類(lèi)型
• 溫和低毒—細(xì)胞活性更高
• 功能多樣—適用于DNA、RNA和共轉(zhuǎn)染的試劑盒

在難轉(zhuǎn)染細(xì)胞類(lèi)型中具有廣泛的優(yōu)良性能

Lipofectamine? 3000試劑充分利用了我們先進(jìn)的脂質(zhì)體納米顆粒技術(shù)，實(shí)現(xiàn)了超高轉(zhuǎn)染性能和可重復(fù)的試驗(yàn)結(jié)果。其可在zui廣泛的難轉(zhuǎn)染和通用細(xì)胞類(lèi)型（圖1）中獲得非凡的轉(zhuǎn)染效率，同時(shí)提升細(xì)胞存活率。



圖1. Lipofectamine? 3000試劑勝過(guò)了Lipofectamine? 2000和FuGENE? HD試劑。每一種試劑均用于以96孔形式轉(zhuǎn)染EK 293、HeLa、LNCaP、HepG2和A549細(xì)胞系，并在轉(zhuǎn)染后48小時(shí)分析GFP表達(dá)情況。在所有五種細(xì)胞系中，Lipofectamine? 3000都表現(xiàn)出了高于Lipofectamine? 2000和FuGENE? HD的GFP轉(zhuǎn)染效率。

圖2. Lipofectamine? 3000操作手冊(cè)在保持易用性的同時(shí)，還保持了優(yōu)異的性能和可靠性，適用于廣泛的細(xì)胞系類(lèi)型。 下載Lipofectamine? 3000操作手冊(cè) >

溫和低毒

在開(kāi)發(fā)Lipofectamine? 3000時(shí)，我們對(duì)轉(zhuǎn)染過(guò)程的四個(gè)步驟進(jìn)行了優(yōu)化，同時(shí)結(jié)合了我們先進(jìn)的脂質(zhì)體納米顆粒技術(shù)。其所具有的超高轉(zhuǎn)染效率使得我們可以減少試劑劑量，降低處理細(xì)胞時(shí)的潛在毒性風(fēng)險(xiǎn)。

圖3. 采用劑量的每種試劑，通過(guò)綠色熒光蛋白(GFP)表達(dá)載體，以96孔形式轉(zhuǎn)染HeLa細(xì)胞。在轉(zhuǎn)染后48小時(shí)，采用流式細(xì)胞儀進(jìn)行分析，以測(cè)定百分比形式的轉(zhuǎn)染效率以及GFP表達(dá)強(qiáng)度。相對(duì)于Lipofectamine? 2000試劑和Lipofectamine? LTX試劑，Lipofectamine? 3000試劑表現(xiàn)出了更高的轉(zhuǎn)染效率和蛋白表達(dá)水平。

增強(qiáng)您的癌癥研究工作

使用生物相關(guān)性的細(xì)胞系，可為您的研究課題提供相關(guān)性的答案。Lipofectamine? 3000試劑適用于zui廣泛的細(xì)胞譜系且兼具較高的轉(zhuǎn)染效率，使您可以非常靈活地在研究中應(yīng)用自己選擇的細(xì)胞。

表1. 在不同的細(xì)胞系中，Lipofectamine? 3000試劑獲得了比Lipofectamine? 2000試劑更高的轉(zhuǎn)染效率。

• 細(xì)胞系 #-C
• 細(xì)胞系 D-J
• 細(xì)胞系 K-P
• 細(xì)胞系 R-Z

細(xì)胞類(lèi)型	Lipofectamine? 3000試劑轉(zhuǎn)染效率	Lipofectamine? 3000相對(duì)于 Lipofectamine? 2000試劑蛋白表達(dá)水平提高倍數(shù)
3T3		4
4T1		2
A431		2
A549		3
ACHN		2
bEnd.3		9
BJ		3
BT-549		4
C2C12		3
C6		5
Caco-2		2
Caki-1		4
CHO-K1		1
CHO-S		1
COLO 205		4
COS-7		4

轉(zhuǎn)染效率 (%): <30%     30-50%    51-79%    >80% 

Lipofectamine? 3000試劑與的Lipofectamine? 2000試劑相比，在多種組織來(lái)源的癌癥細(xì)胞中具有更高的轉(zhuǎn)染效率。在所選的癌癥細(xì)胞系中，使用Lipofectamine? 2000僅有25%被認(rèn)為易于轉(zhuǎn)染（>50%的轉(zhuǎn)染效率），而使用Lipofectamine? 3000卻有60%的細(xì)胞系是易于轉(zhuǎn)染的。

圖4. 采用Lipofectamine? 2000試劑和Lipofectamine? 3000試劑將表達(dá)GFP的質(zhì)粒轉(zhuǎn)染至17種癌癥細(xì)胞系中，利用各試劑推薦的實(shí)驗(yàn)方案，在24孔板中進(jìn)行轉(zhuǎn)染，每孔質(zhì)粒用量為0.5μg。轉(zhuǎn)染48小時(shí)后分析GFP表達(dá)情況。重復(fù)檢測(cè)3次，數(shù)據(jù)點(diǎn)顯示平均轉(zhuǎn)染效率 + 標(biāo)準(zhǔn)差。

生成誘導(dǎo)多能干細(xì)胞（iPSCs）

Lipofectamine? 3000優(yōu)異的轉(zhuǎn)染效率配合Epi5? Episomal iPSC Reprogramming Kit保證了體細(xì)胞的重編程，無(wú)需電轉(zhuǎn)。

圖5. 結(jié)果來(lái)自于明場(chǎng)顯微鏡，(A) Lipofectamine? 3000和 (B) Neon? 轉(zhuǎn)染系統(tǒng)都表明在生成iPSC細(xì)胞群落時(shí)重編程成功了。使用堿性磷酸酶進(jìn)行末端染色。

改善基因組編輯結(jié)果

開(kāi)發(fā)Lipofectamine? 3000試劑，旨在突破輸送技術(shù)的界限，促進(jìn)生物相關(guān)系統(tǒng)內(nèi)的新技術(shù)發(fā)展，例如基因組編輯。通過(guò)這一新試劑，GeneArt? TALs 和 CRISPR 可以靶向HepG2和U2OS細(xì)胞內(nèi)的AAVS1位點(diǎn)，同時(shí)表現(xiàn)出更佳的轉(zhuǎn)染效率、平均熒光強(qiáng)度和基因組切割效果。這些改進(jìn)之處有助于zui大限度減少繁重的下游工作，更便于進(jìn)行干細(xì)胞處理，增強(qiáng)轉(zhuǎn)基因在細(xì)胞基因組中的位點(diǎn)特異性插入。

下載應(yīng)用說(shuō)明 >



圖6. GeneArt? TALs 和 CRISPRs的切割效率。TAL和CRISPR靶向(A) U2OS和(B) HepG2細(xì)胞系中的AAVS1位點(diǎn)。采用GeneArt?基因組切割檢測(cè)試劑盒分析切割效率。



圖7. 使用CRISPR載體時(shí)的轉(zhuǎn)染效率和蛋白表達(dá)。該載體含有OFP報(bào)告基因，并采用Lipofectamine? 2000或Lipofectamine? 3000轉(zhuǎn)染試劑轉(zhuǎn)染到(A) U2OS和(B) HepG2細(xì)胞系中。柱狀圖所示為報(bào)告基因的表達(dá)。圖片所示為相應(yīng)細(xì)胞表達(dá)OFP的熒光圖。

轉(zhuǎn)染干細(xì)胞

圖8. 使用Lipofectamine ? 3000轉(zhuǎn)染H9干細(xì)胞 (A)或iPSC (B)。

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